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产品规格
图文详情
分类:
其他
级别:
优级纯GR
含量:
50T
产品规格:
50T
产品参数
分类：其他 级别：优级纯GR 含量：50T 产品规格：50T
产品特点
ColProof?DNA 病毒快速提取试剂盒
Col-D0501
试剂盒应用
本试剂盒采用裂解液 DV，有针对性的从组织、培养细胞、拭子、血液、尿液、唾液、环境样本中获得病毒 DNA。裂解、提取和纯化只需 10 分钟。使用高*硅基 DNA 纯化柱，高*结合基因组 DNA，从而获得纯度高，产量高的基因组 DNA。提取的基因组 DNA 完整性高，适合 PCR、qPCR、酶切、克隆等。
本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。
使用方法
1. 样本处理方法
1.1 从动物组织中提取
1.1.1 取 20-100mg 组织样本放入液氮中充分研磨，加入 700μL 裂解液 DV，颠倒混匀。
或者取 20-100mg 组织样本加入 700μL 裂解液 DV，加入 1 颗钢珠，放入组织研磨器中，研磨 1-2 分钟。
1.1.2 55℃孵育 1 分钟。12,000rpm 离心 1 分钟。
1.1.3 取 500μL 上清加入 250μL 无水乙*，充分混匀。按照步骤 2.1-2.7 进行操作。
1.2 从细胞中提取
1.2.1 悬浮细胞 1,000rpm 离心 5 分钟，收集细胞沉淀。
或者贴壁细胞经过胰酶消化后 1,000rpm 离心 5 分钟，收集细胞沉淀。
1.2.2 细胞数量为<5×10 6个时，加入 500μL 裂解液 DV。细胞数量为 5×10 6~1×10 7个时，加入 700μL裂解液 DV。轻轻吹打混匀，55℃孵育 1 分钟。
1.2.3 12,000rpm 离心 1 分钟。
1.2.4 细胞数量为<5×10 6个时，取 450μL 上清。细胞数量为 5×10 6~1×10 7个时，取 650μL 上清。
1.2.5 加入 0.5 倍体积无水乙*，充分混匀。按照步骤 2.1-2.7 操作。
1.3 从血液、尿液、唾液、细胞上清液中提取
1.3.1 300μL 样本中加入 500μL 裂解液 DV。颠倒混匀，55℃孵育 1 分钟。
1.3.2 加入 400μL 无水乙*，上下颠倒混匀。按照步骤 2.1-2.7 操作。
1.4 从拭子中提取
1.4.1 拭子置于 700μL 裂解液 DV 中，颠倒混匀，55℃孵育 1 分钟。
1.4.2 加入 350μL 无水乙*，上下颠倒混匀。按照步骤 2.1-2.7 操作。
2. 提取步骤
2.1 全部加入 DNA 吸附柱中（如有需要可离心两次），12,000rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中废液。
2.2 向 DNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 DVI，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。
2.3 向 DNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 DVII，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。
2.4 重复步骤 2.3 一次。
2.5 12,000rpm 离心 2 分钟，倒掉收集管中废液。
2.6 将 DNA 吸附柱放入无 DNase 和无 RNase 离心管中，加入 30-50μL 洗脱液 DV，室温放置 1 分钟。
2.7 12,000rpm 离心 2 分钟，得到 DNA 溶液，-80℃保存。
注意事项
1. 经常更换手套，防止 DNA 污染。
2. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管，防止 DNA 降解。
3. 常更换吸头，防止交叉污染。
4. 动作轻柔，防止病毒 DNA 断裂。
5. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液 DV 置于 65℃水浴后再使用。
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